Cell sorting facs machine

O FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) é uma técnica de citometria de fluxo que separa células vivas individualmente com base em marcadores fluorescentes, essencial em pesquisas imunológicas e oncológicas.

Sobre o tema

O FACS, sigla para Fluorescence-Activated Cell Sorting, é uma tecnologia de citometria de fluxo que permite a separação física de células vivas em populações homogêneas. O processo utiliza um laser para excitar marcadores fluorescentes ligados a anticorpos ou proteínas na superfície celular. Cada célula é encapsulada em uma gota carregada eletricamente e desviada por campos elétricos para tubos de coleta distintos, alcançando purezas superiores a 99%.

Desenvolvido por Leonard Herzenberg na Universidade Stanford na década de 1960, o FACS revolucionou a imunologia ao permitir a purificação de subtipos celulares, como linfócitos T CD4+ e CD8+. Atualmente, máquinas como a BD FACSAria ou a Sony SH800 são amplamente utilizadas em laboratórios de pesquisa e clínicas para aplicações que vão desde a caracterização de células-tronco até a engenharia de células CAR-T para terapias contra o câncer.

Além da separação, o FACS também quantifica múltiplos parâmetros por célula, como tamanho (FSC) e granulosidade (SSC), combinados com até 18 ou mais fluorescências simultâneas. Isso permite análises complexas de fenótipos celulares em amostras heterogêneas, como sangue periférico ou suspensões tumorais. A técnica exige citometristas treinados e controle de qualidade rigoroso para evitar danos às células e garantir resultados reprodutíveis.

Curiosamente, o FACS é uma das poucas tecnologias que podem classificar e coletar células vivas individuais para cultivo posterior ou ensaios funcionais, diferindo de métodos como a citometria de fluxo analítica, que apenas mede e descarta as amostras. O custo elevado dos equipamentos (centenas de milhares de dólares) é justificado pela precisão e versatilidade, sendo uma ferramenta indispensável em biologia celular e molecular.

• Fonte: BD Biosciences, Stanford University
• Aplicações: Imunofenotipagem, isolamento de células raras, seleção de clones transgênicos

Perguntas frequentes

Qual a diferença entre FACS e citometria de fluxo comum?

A citometria de fluxo comum apenas analisa e mede as células, descartando-as. O FACS, além de analisar, separa fisicamente as células em populações puras, permitindo coletá-las vivas para experimentos posteriores.

O FACS pode danificar as células?

Sim, o processo pode causar estresse celular devido à pressão, laser e campos elétricos. No entanto, ajustes como bicos de diâmetro maior e baixa pressão minimizam danos, mantendo viabilidade acima de 90% para a maioria das células.

Quais marcadores fluorescentes são usados no FACS?

Fluorocromos como FITC, PE, APC, PerCP e Pacific Blue são comuns, acoplados a anticorpos específicos. A escolha depende da excitação do laser e da necessidade de multiplexação.